六通进样阀是高效液相色谱系统中最常见的进样器,它是由圆形密封垫(转子)和固定底座(定子)组成。美国Rheodyne公司的六通阀进样器最为常用,约占整个液相市场的95%。
工作原理:
1、手柄位置在取样(Load)时,样品经微量进样针从进样孔注射进定量环,定量环充满后,多余样品从放空孔排出。
2、将手柄转动至进样(Inject)位置时,阀与液相流路接通,由泵输送的流动相冲洗定量环,推动样品进入色谱柱进行分析。 虽然六通阀进样器具有结构简单、使用方便、寿命长、日常无需维修等特点,但正确的使用和维护将能增加使用寿命,保护周边设,同时增加分析准确度。如使用得当的话,六通阀进样器一般可连续进样3万次而无需维修。
六通进样阀的使用及保养
1、手柄不能停留在中途位置(Load和Inject之间),因中途位置暂时堵住了流路,流路中压力骤增,再转到进样位,过高的压力容易损坏色谱柱,所以应尽快转动阀。在高效液相系统中使用的注射器是平头注射器。一方面,针头外侧紧贴进样器密封管内侧,密封性能好,不漏液,不引入空气;另一方面,也防止了针头刺坏密封组件及定子。
2、六通阀进样器有两种进样方式:一是有部分装液法,使用部分装液法进样时,进样量最多为该定量环体积的75%,比如20uL的定量环最多注入15uL样品,并且要求每次进样体积准确、相同;二是完全装液法,使用完全装液法进样时,进样量最少为该定量环体积的3到5倍,即20uL的定量环最少进样60至100uL的样品,这样才能完全置换样品定量环内残留的溶液,达到所要求的精密度及重现性。烜晟科仪推荐使用100uL的平头进样针和20uL定量环进样。
3、也可根据进样体积的需要自已制作定量环,一般不要求精确计算定量环的体积,比如,一根为10uL的定量环,实际是9uL还是11uL并不重要,只要被测样品和标准样品的进样体积保持一致即可。
4、由于该阀死体积小,样品溶液均要用0.45u的滤膜过滤。防止微粒阻塞进样阀和减少对进样阀的磨损。如果进样样品无法去除微粒,则在进样时使用针式过滤器,此时可改用医用的1mL一次性注射器,配合进样阀附件中的特殊针头使用。此种办法最为经济合算,因为医用的一次性注射器价格低廉。需要注意的是,针式过滤器有水性的和油性的区分,不要用错。
5、为防止缓冲盐和其它残留物质留在进样系统中,每次结束后应冲洗进样器,通常用不含盐的稀释剂、水或不含盐的流动相冲洗,在进样阀的Load和Inject位置反复冲洗,再用无纤维纸擦净注射器针头的外侧。并且不定期的断开色谱柱做全阀冲洗。另外一种清洗方法是:采用进样阀附件中的特殊清洗头(乳白色,聚四氟乙烯材料的),配合1mL以上的医用注射器,用纯水和甲醇清洗定量管,清除定量管、排放孔及排放管道中残留的样品中的缓冲盐和有机物。
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