高效液相色谱定性/定量分析
在定性的基础上定量,需有纯物质作为标准物液相色谱定量是相对定量的方法:即由已知量的纯标样推算混合物中被测物的量定量的依据是:
a）被测组分的量与响应值(峰高或峰面积)成正比
b）由已知量的标样可求得定量校正因子
c）定量校正因子:是定量计算公式中的比例常数,其物理意义是单位响应值(峰面积)所代表的被测组分的量
d）测定未知组分的响应值,通过定量校正因子即可求得其含量
常用的定量方法
外标法：在高效液相色谱中用得最多
内标法：准确，但是麻烦，在标准方法中用得最多
鉴别需定量的色谱峰(定性)
色谱峰定性鉴别每个要定量的色谱峰
首先用标样确定欲定量之色谱峰的保留时间(Rt)，通过比较保留时间,找到未知样中各色谱峰所对应的组份，色谱定性是用与标样比较保留时间的方法，判据并不充分进一步的确认(定性)
1、标准加入法
2、同时用其它方法：其它色谱方法(改变机理,如:用不同的色谱柱)
3、其它仪器方法
高效液相色谱定量分析的步骤
1、选择一个适合定量分析的色谱方法：
a）首先确认被检测组分峰,并达到分离度(R)大于1.5
b）被确定被测组分色谱峰的一致性(纯度)
c）确定方法的检测限及定量限;灵敏度及线性范围
2、建立校正曲线需用不同浓度的标准样品
3、检验定量方法的准确度及精密度
4、用相应的色谱管理软件实施样品采集,数据处理及报告结果
确认色谱峰的一致性(纯度)
确保每个峰下只有一个被测的组份（不能重合峰）
检查是否有共流出的物质（杂质）干扰
色谱峰一致性(纯度)确认的方法
用高效液相检测器比较谱图
峰纯度鉴定
影响定量分析结果的因素
准确度不好可能由下述原因造成:
–峰面积积分不正确、样品分解或制样时导入杂质、样品瓶不密封,样品或溶剂挥发、制样不正确、进样问题、内标制备不正确
精密度不好可能的原因:
峰积分不正确、进样或进样器有问题、样品分解或制样时引入了杂质、色谱本身问题、检测器灵敏度下降
他们都选择了上海烜晟科仪
上海烜晟科学仪器有限公司
|  | 地址 上海市嘉定工业区汇源路55号（中广国际产业园内） |
|  | 联系方式 电话：400-780-9599 大客户经理：15021595718 |
|  | 邮箱 xskx17@126.com |
